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1、目的：建立發(fā)酵罐的清洗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。
2、范圍：適用于5L以上生物發(fā)酵罐。
3、職責(zé)：操作人員、設(shè)備責(zé)任人、工程部人員、設(shè)備管理員負(fù)責(zé)執(zhí)行本制度。
4、程序：
4.1罐體的預(yù)清洗
4.1.1每一批發(fā)酵結(jié)束，放出物料。小心卸下pH和DO電極，用自來(lái)水將電極沖洗干凈后，按《中試pH電極維護(hù)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》和《中試溶氧電極標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》進(jìn)行操作。
4.1.2將罐上pH和DO電極插孔用少量自來(lái)水沖洗干凈，后用配套活塞塞上，并用螺蓋旋緊。并將操作內(nèi)容記錄。
4.1.3對(duì)50L以下的罐體清洗需松掉上蓋螺絲和各連接處，拆下發(fā)酵罐上蓋，卸下接種帽、補(bǔ)料孔塞、消泡劑探頭和各預(yù)留孔塞等，用抹布清洗擦試每個(gè)部件，用自來(lái)水沖干凈。用軟毛刷刷洗蓋子、蓋與罐體的接口處、罐內(nèi)壁和攪拌機(jī)封處，用自來(lái)水沖盡殘?jiān)蜌堃?，沖洗時(shí)要用水桶收集沖洗水。檢查皮圈并用抹布清洗干凈（如有老化，及時(shí)更換并記錄），然后依次將部件配好，將發(fā)酵罐蓋上，對(duì)稱旋緊固定螺釘，通空氣保壓檢查密封性，如有漏氣及時(shí)卸壓，并檢查漏氣的地方進(jìn)行處理和解決。并將操作內(nèi)容記錄。
4.1.4對(duì)50L以上的罐體清洗需松掉投料蓋，接種帽、補(bǔ)料孔塞、消泡劑探頭和各預(yù)留孔塞等，用抹布清洗擦試每個(gè)部件，用自來(lái)水沖干凈。打開(kāi)電源視燈，檢查罐體內(nèi)壁有無(wú)大塊的渣等雜物存在，如果有，用專用的工具將雜物取出。用軟毛刷刷洗蓋子內(nèi)壁、蓋與罐體的接口處、罐內(nèi)壁和攪拌機(jī)封處，用自來(lái)水沖盡殘?jiān)蜌堃?，沖洗時(shí)要用水桶收集沖洗水。檢查皮圈并清洗干凈（如有老化，及時(shí)更換），然后依次將部件配好，通空氣保壓檢查密封性，如有漏氣及時(shí)卸壓，并檢查漏氣的地方進(jìn)行處理和解決。并將操作內(nèi)容記錄。
4.2堿洗
4.2.1預(yù)清洗檢查完畢，泄壓后，打開(kāi)進(jìn)料口，用清水將發(fā)酵罐注滿。估算加水體積進(jìn)行記錄。
4.2.2按每升洗水加入NaOH片堿10克或NaOH工業(yè)堿25毫升，按實(shí)進(jìn)行記錄。關(guān)閉進(jìn)料口，開(kāi)啟攪拌，轉(zhuǎn)速300rpm，攪拌均勻后，用夾套升溫至90－95℃，保溫1h。將操作內(nèi)容記錄在清洗表格中。
4.2.3冷卻至50℃以下時(shí)，將罐內(nèi)堿液從底閥排出。用有蓋的塑料桶先把堿液蓄好，以備回收甲醛。
4.2.4用足夠的自來(lái)水沖洗罐內(nèi)殘留的堿，直至流出的沖洗液PH為中性為止。將操作內(nèi)容記錄在清洗表格中。
4.3甲醛熏蒸
4.3.1堿洗后按下列程序熏蒸一次。此步驟適用染菌發(fā)酵罐批堿洗后，適用正常發(fā)酵第10批堿洗后，適用發(fā)酵罐停用一個(gè)月以上恢復(fù)使用時(shí)。如果要清洗時(shí)，在表格中“否”的位置打勾，并做好相關(guān)記錄。否則在表格中“是”的位置打勾，跳過(guò)此步操作。
4.3.2尾氣裝置的安裝：將排氣口、取樣口、放料口閥門(mén)連上塑膠管，塑膠管直通尾氣瓶，瓶?jī)?nèi)裝滿三分之二的1%堿液（可采用4.1.5中所述的回收堿液）。
4.3.3堿洗完成后，關(guān)閉罐體底閥，然后往罐內(nèi)加入自來(lái)水覆蓋掉罐內(nèi)的蒸汽管出口即可，每10L體積的發(fā)酵罐加入37%的工業(yè)甲醛50mL，記錄甲醛用量關(guān)閉投料口，注意接好尾氣裝置（甲醛有毒，避免吸入），緩慢攪拌使溶液均勻，轉(zhuǎn)速100rpm。
4.3.4往發(fā)酵罐內(nèi)直通蒸汽升溫至90－95℃關(guān)閉蒸汽閥門(mén)，密閉保溫30分鐘，注意發(fā)酵罐不要超溫和超壓。后打開(kāi)排氣閥一點(diǎn)點(diǎn)，通蒸汽到100℃保溫30分鐘，排出的蒸汽收集在尾氣瓶里。
4.3.5保溫完畢后，關(guān)閉蒸汽進(jìn)閥門(mén)，緩慢從排氣口泄罐壓，保持尾氣裝置。
4.3.6用自來(lái)水沖洗發(fā)酵罐內(nèi)壁，從發(fā)酵罐底閥排干發(fā)酵罐，關(guān)閉發(fā)酵罐所有的進(jìn)出口閥門(mén)。
4.4空罐滅菌
4.4.1緩慢往發(fā)酵罐內(nèi)直通蒸汽，控制發(fā)酵罐的排氣閥門(mén)，保持罐壓在0.11mpa，升溫至121℃，并保溫1小時(shí)。
4.4.2保溫完畢后，關(guān)閉蒸汽，從排氣口泄罐壓(保持尾氣裝置)，卸壓完畢保持排氣閥門(mén)開(kāi)著。
4.4.3用夾套冷水冷卻發(fā)酵罐，拆掉尾氣裝置。從出料閥放干凈罐體內(nèi)的冷凝水。
4.4.4接下來(lái)可以進(jìn)行發(fā)酵操作。